Guterres M. V., Ferreira M. M. C., Volpe P. L. O., "Determinação de creatinina em soro humano com calibração de segunda ordem" ["Determination of creatinine in human serum with second-order calibration"]. São Luiz, MA, 14-17/10/2003: XII Encontro Nacional de Química Analítica (XII ENQA) [12th National Meeting of Analytical Chemistry], Caderno Eletrônico de Resumos (CD-ROM) [Electronic Notebook of Abstracts (CD-ROM)], (2003). Poster QM038.
Português
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DETERMINAÇÃO
DE CREATININA EM SORO HUMANO COM
CALIBRAÇÃO
DE SEGUNDA ORDEM
Guterres, M. G. (PG); Ferreira, M. M. C. (PQ); Volpe, P. O. L. (PQ)
Universidade
Estadual de Campinas, Instituto de Química - Campinas - SP,
guterres@iqm.unicamp.br
Palavras chave:
calibração de segunda ordem, creatinina, soro humano
A concentração
de creatinina em soro humano é
importante parâmetro clínico usado
para avaliar
a função renal de pessoas submetidas
ao processo de hemodiálise. O
método cinético
da reação de Jaffé é o método
analítico mais utilizado nos laboratórios
de patologia clínica
para a determinação de creatinina em soro humano. Neste
método, a
creatinina
reage com ácido pícrico em
meio alcalino para formar um
composto
vermelho que
pode ser medido por fotometria no comprimento de onda
de 500 nm. O
método cinético
de Jaffé é simples e adequado para
análises que exigem uma demanda
alta. Entretanto,
existe um número significativo de
substâncias que podem interferir
com a medida feita
para a creatinina no soro humano e como consequencia
o método
pode ter interferências
não detectadas, mesmo em condições otimizadas.
Neste trabalho
é proposta
uma metodologia para a análise de creatinina
em soro humano baseada no
monitoramento
cinético da reação de Jaffé
com um espectrofotômetro com arranjo de
diodos. Este
procedimento permite coletar dados de segunda ordem
para cada amostra
(comprimento de onda
x tempo). Com isto, o conjunto de dados pode ser organizado
em
um arranjo multidimensional
para ser analisado com os métodos de análise
multivariada
de ordem superior.
A vantagem desta metodologia de análise quantitativa é
que os sinais
das diferentes
substâncias que absorvem na região
visível do espectro podem ser
resolvidos,
de modo que não é necessário para
a determinação quantitativa, separar o
analito da amostra
por processos físico-químicos. Foram investigados
dois métodos de
ordem superior,
ambos baseados no algoritmo dos quadrados mínimos alternados
para a
resolução
de curvas. O primeiro deles, o método "PARAFAC",
usado para ajustar um
modelo de tipo
trilinear. O outro, o método "Tucker Restrito",
usado para ajustar um
modelo com
desvio de trilinearidade. Os dois métodos
foram testados com misturas
preparadas no
laboratório contendo além da creatinina,
as substâncias albumina e
bilirrubina que interferem
na determinação de creatinina pelo método
cinético de Jaffé.
O modelo
PARAFAC apresentou os melhores resultados
com um erro de predição
residual médio
(RMSEP) de 0,73 mg/l para o intervalo de
1 a 50 mg/l de creatinina.
Posteriormente
a metodologia foi testada em amostras de soro humano
e os resultados
coparados com
aqueles obtidos pelo método cinético
de Jaffé. Usando o modelo
PARAFAC obteve-se
um erro de 6,14% para o intervalo de concentração
de 5-80 mg/l
de creatinina.
FAPESP
English
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DETERMINATION
OF CREATININE IN HUMAN SERUM WITH
SECOND-ORDER
CALIBRATION
Guterres, M. G. (PG); Ferreira, M. M. C. (PQ); Volpe, P. O. L. (PQ)
Universidade
Estadual de Campinas, Instituto de Química - Campinas - SP,
guterres@iqm.unicamp.br
Key words: second-order
calibration, creatinine, human serum
The creatinine
concentration in human serum is an important clinical
parameter that is
used for evaluation
of the renal function in persons that are treated with hemodialysis. The
kinetic method of
the Jaffé reaction is the most used analytical method
for determination
of creatinine in human
serum in clinical pathology laboratories. In this method,
creatinine
reacts with picric
acid in alkaline medium and form a red product which can be
measured
with photometry at
wavelength 500 nm. The kinetic method of Jaffé is simple and
suitable
for analyses
with high demands. There are many substancies
that interfere during the
creatinine determination
in human serum, and as a consequence, the method
can include
undetected interferences
even under optimized conditions. In this work,
a methodology
for analysis of creatinine
in human serum, based on kinetic monitory of the Jaffé
reaction
by means of
diode array spectrophotometer, is proposed.
This procedure permitts the
collection of
second-order data for each sample (wavelength x time).
With this, the data
set can be organized
in an multidimensional array to be analyzed
with the multivariate
analysis of
the higher order. An advantage of this quantitative
methodology is that the
signals of different
substancies which absorb in the visible region can be resolved
without
physico-chemical separation
of the analyte from the sample. Two
high-order methods,
both based on
alternate least squares for curve resolution, were investigated.
One of them,
the method
"PARAFAC", was used to adjust a
trilinear model. The other method,
"Restricted Tucker",
was used to adjust a model with deviations
from trilinearity. The
both methods
were tested with mixtures prepared
in laboratory, besides creatinine
containing albumin
and bilirubine that interfere
the creatinine determination by the
kinetic method
of Jaffé. The PARAFAC model showed the best results
with the mean
prediction error
(RMSEP) of 0.73 mg/l for interval
from 1 to 50 mg/l of creatinine.
The methodology
was tested later with samples of human serum
and the results were
compared with
those obtained by kinetic method of Jaffé.
Using the PARAFAC model,
error of 6.14%
was obtained for interval of creatinine concentration 5-80 mg/l.
FAPESP