Perez E. F., Ferreira M. M. C., Kubota L. T., "Determinação Simultânea de Salicilato, Ácido Úrico e Ácido Ascórbico Utilizando Espectroscopia UV-VIS e Calibração Multivariada" ["Simultaneous Determination of Salicilate, Uric Acid and Ascorbic Acid Using UV-VIS Spectroscopy and Multivariate Analysis"]. Santa Maria, RS, 31/08-03/09/1999: X Encontro Nacional de Química Analítica (X ENQA) [10th National Meeting of Analytical Chemistry], Resumos [Abstracts], (1999) QM–34. Poster QM–34.
QM
- 34
DETERMINAÇÃO
SIMULTÂNEA DE SALICILATO, ÁCIDO ÚRICO E
ÁCIDO
ASCÓRBICO UTILIZANDO ESPECTROFOTOMETRIA UV - VIS E
CALIBRAÇÃO
MULTIVARIADA
Elizabeth
Fátima Perez (PG), Márcia M. C. Ferreira (PQ),
Lauro
Tatsuo Kubota (PQ)
Instituto
de Química - Unicamp Caixa Postal 6154 Campinas - SP.
palavras-chaves:
CALIBRAÇÃO MULTIVARIADA, ESPECTROFOTOMETRIA UV - VIS,
AMOSTRAS
DE INTERESSE BIOLÓGICO
Atualmente as análises clínicas utilizam
kits enzimáticos para a determinação
da
maioria
dos metabólitos eliminados pelo organismo
através da urina. O salicilato,
o
ácido
úrico e o ácido ascórbico são compostos
de grande interesse em análises clínicas
e
podem ser indicadores de doenças ou
estarem associados a um falso diagnóstico
dessas
doenças. O espectro desses
compostos encontram-se muito sobrepostos
impossibilitando
uma quantificação univariada.
O trabalho tem por objetivo
a
quantificação
desses três compostos utilizando espectrofotometria UV - VIS
e calibração
multivariada.
Os espectros de absorbância das misturas de ácido
úrico, salicilato de sódio e
ácido
ascórbico foram obtidos em um espectrofotômetro
Pharmacia Biotech na região
de
210 à 400 nm. As misturas foram preparadas em tampão acetato
0,1 mol L-1 pH=4,8,
segundo
planejamento fatorial 43 (quatro níveis
de concentração e 3 fatores), TABELA 1.
Desse
conjunto de 64 espectros, retirou-se aleatoriamente
15 amostras, que foram
reservadas
como conjunto teste e o restante foi utilizado para a construção
do modelo
de
calibração. O tratamento dos dados
foi feito no programa Pirouette versão
2.02.
TABELA
1 - Concentrações de ácido ascórbico, ácido
úrico, salicilato de sódio, utilizados
nas
misturas para o planejamento fatorial.
______________________________________________________________________
Níveis
______________________________________________________________________
fatores
a* mmol
L-1
b*mmol
L-1
c*mmol
L-1
d*mmol
L-1
______________________________________________________________________
ácido
ascórbico
50
80
100
150
______________________________________________________________________
ácido
úrico
30
50
80
100
______________________________________________________________________
salicilato
50
80
100
240
______________________________________________________________________
Na calibração multivariada
utilizando o método
PCR (Regressão por
Componentes
Principais), os dados foram centrados na
média sendo necessárias 3
componentes
principais para construção do modelo. O coeficiente
de correlação obtido
para
cada componente da mistura foi muito bom (salicilato
r=0,9994; ácido ascórbico
r=0.9996
e ácido úrico r=0,9967). A previsão
do conjunto teste utilizando esse modelo
mostrou-se
muito satisfatório, sendo o erro em média de 1% para o ácido
ascórbico, 2%
para
o salicilato e 4% para o ácido úrico. Dessa
maneira o método mostra um grande
potencial
para a determinação simultânea desses compostos em
misturas.
FAPESP,
CNPq
English
QM
- 34
SIMULTANEOUS
DETERMINATION OF SALICILATE, URIC ACID AND
ASCORBIC
ACID USING UV - VIS SPECTROSCOPY AND
MULTIVARIATE
ANALYSIS
Elizabeth
Fátima Perez (PG), Márcia M. C. Ferreira (PQ),
Lauro
Tatsuo Kubota (PQ)
Instituto
de Química - Unicamp Caixa Postal 6154 Campinas - SP.
key-words:
MULTIVARIATE CALIBRATION, UV - VIS SPECTROPHOTOMETRY,
SAMPLES
OF BIOLOGICA INTEREST
Clinical analyses use enzymatic kits for determination
of most of metabolytes that
are
eliminated by an organism via urine.
Salicilate, uric acid and ascorbic
acid are
compounds
of great interest in clinical analyses and
can be indicators of diseases or
can
be related to false diagnostics of these diseases. The
spectra of these compounds
are
superimposed what disables their univariate quantification. The objective
of this work
is
to quantify these three compounds by
means of UV - VIS spectrophotometry and
multivariate
calibration.
The absorption spectra of the mixtures of uric acid,
sodium salicilate and ascorbic
acid
were obtained with Pharmacia Biotech spectrophotometer in the
region from 210 to
400
nm. The mixtures were prepared in acetic buffer
0.1 mol L-1 pH=4.8, based
on the
factorial
design 43 (four levels
of concentration and 3 factors), TABLE 1. From this
set
of
64 spectra, 15 samples were excluded
randomly and later on were used in
the
prediction
set, while other samples were used for the construction of the calibration
model.
The
data analysis was performed by using program Pirouette version 2.02.
TABLE
1 - Concentration of ascorbic acid, uric acid, and sodium salicilate
as used in the
mixtures
for the factorial design.
_______________________________________________________________________
Levels
_______________________________________________________________________
factors
a* mmol
L-1
b*mmol
L-1
c*mmol
L-1
d*mmol
L-1
_______________________________________________________________________
ascorbic
acid
50
80
100
150
_______________________________________________________________________
uric
acid
30
50
80
100
_______________________________________________________________________
salicilate
50
80
100
240
_______________________________________________________________________
In multivariate calibration using
the PCR method (Principal
Component
Regression),
the data were mean-centered and 3 principal components were
necessary
for
construction of the model. The obtained correlation coefficient for
each component of
the
mixture was good (salicilate r=0.9994; ascorbic acid r=0.9996 and uric
acid r=0.9967).
The
prediction based on this model for the prediction
set was satisfactory, with mean
error
1% for ascorbic acid, 2% for salicilate and 4% for uric acid.
In this way, the method
shows
great potential for simultaneous determination of the compounds in the
mixture.
FAPESP,
CNPq