68.

Vendrame R., Ferreira M.M.C., Takahata Y., "Atividades contraceptiva e progestacional de progestogênios: Estudos SAR empregando métodos de reconhecimento de padrões" ["Contraceptive and progestational activity of progestogens: SAR studies using pattern recognition methods"]. Poços de Caldas, MG, 23-26/05/2000: 23a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química: A Ligação Química Brasil/Portugal [23rd Annual Meeting of the Brazilian Chemical Society: The Chemical Bond Brazil/Portugal], Livro de Resumos [Book of Abstracts], 2 (2000) MD-024. Poster MD-024.


Português
MD-024

ATIVIDADES CONTRACEPTIVA E PREOGESTACIONAL DE
PROGESTOGÊNIOS: ESTUDOS SAR EMPREGANDO MÉTODOS DE
RECONHECIMENTO DE PADRÕES

Rosana Vendrame1  (PQ),  Márcia Miguel Castro Ferreira2  (PQ),  Yuji Takahata2  (PQ)

1 Instituto  de  Física,  Universidade Estadual de Campinas,  13083-970  Campinas,  SP,
 Brasil

2 Instituto  de  Química,  Departamento  de  Físico-Química,  Universidade  Estadual  de
Campinas, 13083-970 Campinas, SP, Brasil

palavras-chave: progestogênios, SAR, reconhecimento de padrões.

          Os  novos  Contraceptivos  Orais  Combinados  (COCs)  são  em  geral  resultado
da  combinação  entre   etinilestradiol   (EE)   e   um   dos   três   novos  progestogênios:
desogestrel (DSG),  gestodene (GSD)  e  norgestimato (NGM).   Por serem amplamente
utilizados  em  todo  o  mundo,   a  procura por  COCs  mais efetivos  e  livre  de  efeitos
colaterais  tem  se  mantido  por  mais  que  três  décadas.   Ainda   não  se  chegou  ao
contraceptivo  ideal   [1].   Recentemente,  foram  realizados  estudos  da  relação  entre
estrutura-atividade  contraceptiva/efeito  androgênico  para  um  conjunto  inicial de seis
progestogênicos,   entre  os quais os três novos estão incluídos.  No  presente  trabalho,
um novo conjunto  molecular  foi  adicionado  ao  inicial para testar  a  confiabilidade dos
resultados    obtidos.     O     novo    conjunto    molecular    consiste    de     19     17alfa-
acetoxiprogesteronas  substituídas   (APs),   cujas  atividades  progestacionais  relativas
são conhecidas [2].   Suas  estruturas moleculares são muito similares  com aquelas  do
conjunto inicial  e  todas estas moléculas pertencem  à  família dos progestogênios.  Em
adição,    resultados    experimentais   mostram   que    a    inibição   da   ovulação   está
diretamente   relacionada   com   a   atividade   progestacional    [3].   Assim,   utilizamos
análise  de  componentes  principais  (PCA)   para  analisar  as  25  moléculas  (19  APs
adicionadas  aos  6  progestogênios  iniciais),   empregando   exatamente   os   mesmos
descritores selecionados para  o  conjunto  inicial  de  seis  progestogênios.  Os estudos
SAR  podem  ser  úteis  no "design"  de  drogas  mais aprimoradas através da revelação
da características moleculares que se correlacionam com a atividade biológica [4].
          Os  objetivos  deste  trabalho  foram:   1)  testar  a  confiabilidade  dos  resultados
obtidos  com  PCA  e  HCA  para  um  conjunto  de  seis  progestogênios  com  atividade
contraceptiva oral,  2)  verificar  a  possível interpretação  dos  descritores selecionados
com as interações químicas na formação do complexo progestogênio-receptor.
          Os  métodos   de   reconhecimento   de   padrões   como    PCA    e    análise   do
agrupamento   hierárquico     (HCA)     foram     empregados    utilizando    o    programa
computacional   Pirouette  [5].   Os   descritores    físico-químicos   selecionados   foram
calculados  através  do  método  semi-empírico  AM1  (Austin Model 1)  [6].  Inicialmente
foram calculados  45  descritores para o conjunto  de  6  progestogênios,  sendo  que  5
deles  foram  selecionados  por   PCA   como   os   mais  eficientes   na   separação   da
molécula menos ativa das mais mais ativas.  São eles: potencial de ionização,  dureza e
cargas atômicas nas posições 10, 13 e 17 do esqueleto esteroidal.
          Utilizando   descritores   similares    para   o   conjunto   de   25   moléculas,   PCA
separou este grupo em  3  regiões distintas  no gráfico  de  escores  das duas  primeiras
componentes  principais:   (1)   a   primeira  região  agrupa  os  compostos   com  menor
atividade contraceptiva  e menores atividades  progestacionais,  (2)  a  segunda  agrupa
os  compostos   com   maiores  atividade  progestacionais  e   (3)  a  terceira  agrupa  os
compostos  com  maiores  atividades contraceptivas.   A  primeira  componente principal
(PC1)  discrimina   as  17alfa-acetoxiprogesteronas  (primeira  e  segunda  regiões)  das
não-acetoxiprogesteronas   (terceira  região)   e  a   segunda,   PC2,   separa  moléculas
mais ativas  (segunda e terceira regiões)  das menos ativas  (primeira região).
          Podemos   concluir   que   os   descritores   selecionados,   utilizando   o  pequeno
conjunto de seis  progestogênios,   mostraram-se eficientes  na  classificação molecular
global.   Em  adição,   estes descritores  puderam  ser interpretados  com  as  interações
químicas entre o complexo progestogênio-receptor  [7].
          A  partir   de   1998   tornaram-se   bem   conhecidas   as   interações   específicas
presentes   no   complexo   progesterona-receptor   [7].   Sabe-se   que    o  anel   A    do
progestogênio   estabelece   contato  íntimo  específico  com  o  receptor,   enquanto  no
restante  do  esteróide  o  contato  é  menos específico  [8].   As interações  no anel A do
progestogênio  ocorrem  principalmente com  o  oxigênio  (posição  3-ceto  do  esqueleto
esteroidal)  [7].  Nossos  cálculos  mostraram  que  o  Homo  dos    progestogênios  está
localizado  exatamente  neste  oxigênio.   O  potencial  de  ionização  é devido ao evento
de  ionização  no  Homo  que  tem  predominantemente  caráter  não-ligante na  posição
3-ceto.  A dureza está relacionada  ao  Homo e Lumo,  que está no orbital  pi  antiligante
de  carbonila  na  posição  3  (anel A).   A  carga   na  posição  17  (e  possivelmente  na
posição 13) do anel  D podem  exercer  influência  no  anel  A.   As  interações  a  "longa
distância" entre as posições  3  e  17 são  bem  conhecidas [9]  e  exercem considerável
influência na atividade, conformação e transferência eletrônica intramolecular.
          De   modo   geral,    os   descritores   selecionados   mostraram   estar   direta   ou
indiretamente relacionados com o anel  A  do progestogênio.
FAPESP, CAPES

Bibliografia
[1] Alexander, N. J., Scientific American, September, 104-109 (1995).
[2] Shoppee,  C.  W.,  Chemistry  of  Steroids,  2nd  ed.,  Ed.  Spottiwoode, Ballantyne  &
Co. Ltd., London, 1964, p. 185.
[3] Ringhold,  H.  J.,  Batres,  E., Bowers,  A.,  Edwards,  J.  Zderic,  J.,  J.  Amer. Chem.
Soc., 81, 3485-3486 (1959).
[4] Jurs, P. C., Chou, J. T. and Yuan, M., J. Med. Chem., 22, 476 (1979).
[5] Pirouette Multivariate Data  Analysis  for  IBM  PC Systems,  (version 2.0), Infometrix,
Seattle, WA (1996).
[6] Dewar, M. J. S. and Thiel, W. J., J. Am. Chem. Soc., 99, 4899 (1977).
[7] William, S. P.&Sigler, P. B., Nature, 393, 392-396 (1998).
[8] Duax,  W.  L.,  Griffin,  J.  F.  &  Weeks,  C.  M.,  in:  Interaction  of  Steroid  Hormone
Receptors with  DNA,  ed. Sluyser M.,  Ellis  Horwood  Ltd., Chichester,  England,  1985,
p. 83.
[9] Cvitas, T.; Kovac, B.;  Pasa-Tolic, Lj.; Ruscic, B.;  Klasinc, L.; Knop, J. V.; Bhacca, N.
S. and McGlynn, S. P., Pure & Appl. Chem., 61, 2139-2150 (1989).


English
MD-024

CONTRACEPTIVE AND PREOGESTATIONAL ACTIVITY OF
PROGESTOGENS: SAR STUDIES USING
PATTERN RECOGNITION METHODS

Rosana Vendrame1  (PQ),  Márcia Miguel Castro Ferreira  (PQ),  Yuji Takahata2   (PQ)

1 Instituto  de  Física,  Universidade  Estadual  de Campinas,  13083-970  Campinas,  SP,
 Brasil

2 Instituto  de  Química,  Departamento   de  Físico-Química,  Universidade  Estadual   de
Campinas, 13083-970 Campinas, SP, Brasil

key-words: progestogens, SAR, pattern recognition.

          New    Combinations   of   Oral   Contraceptives    (COCs)    are   combinations    of
etinilestradiol  (EE)  and one of three new progestogens:  desogestrel  (DSG),  gestodene
(GSD) and norgestimate (NGM).  COCs are in use worldwide,  what  has been the reason
for finding  new  COCs  which  are  more effective and  free  of  side effects  for more than
three decades. Still there is no an ideal contraceptive [1].  Recent studies on relationships
between structure  and  contraceptive/androgenic  activity  were  performed  for  an  initial
set  of  six  progestogens,   including  the  three  new progestogens.  In  the present  work,
a new set  of  molecules was added  to the initial set,  with  the aim to verify the validity  of
obtained  results.   The  new   set  of  molecules   consists  of   19   substituted   17-alpha-
acetoxyprogesterons  with  known   activities  [2].   Their  molecular   structures   are  very
similar to those of the initial set,  and  besides,  all  the molecules belong  to  the  family of
progestogens. Experimental results have shown that their inhibition of ovulation is directly
related to  progestational activity  [3].  Therefore,  principal component  analysis  (PCA) is
used to analyze  25  molecules  (19  APs  and  6  initial  progestogens),  using   the  same
descriptors as selected for the  initial set of six progestogens. SAR  studies can be  useful
for  design  of   more  effective  drugs  when   molecular  characteristics   correlated   with
biological activities are identified [4].
          The  purpose  of  this  work is:  1)  to verify the confidence of HCA and PCA results
for the set of  six  progestogens  with oral  contraceptive activity,  2)  to  interpret selected
molecular  descriptors   in   terms   of   chemical   interactions   during   the   formation   of
progestogen-receptor complex.
          Pattern recognition methods as PCA  and  hierarchical cluster analysis  (HCA) were
used from  computational  program  Pirouette  [5].  Selected  physico-chemical descriptors
were calculated by the semi-empirical method AM1 (Austin Model 1) [6].  In  the beginning,
45 descriptors were calculated for  the set of  6 progestogens, among which 5 descriptors
were  selected  when  using  PCA  as  the most responsible  for  separation  of less active
molecules  from more active  ones.  The  descriptors  are:  ionization  potential,  hardness,
atomic charges at positions 10, 13 and 17 of the steroidal skeleton.
          When  using  similar  descriptors for  the set  of  25  molecules, PCA  separated this
group into  3  distinct  regions  in  the  scores plot  of  the  first  two  principal  components:
(1)  the  first region is a cluster  of  compounds  with  lower contraceptive activity  and also
lower  progestational  activity,   (2)   the  second  region  contains   compounds  with  high
progestational   activity,   and   (3)   the   third   region  clusters   compoounds   with   high
contraceptive  activity.   The   first  principal  component   (PC1)   discriminates   17-alpha-
acetoxyprogesterons  (the first and  second regions)  from  non-acetoxyprogesterons  (the
third region).  PC2  separated more active molecules  (the second and third regions)  from
less active ones (the first region).
          It can be concluded that  the  selected descriptors,  when using the small set of  six
progestogens,    were  effective  in  classification  of  the  molecules.    In  addition,  these
descriptors can be intepreted in terms of chemical interactions in complexes progestogen-
receptor [7].
          Interactions  in  complex progestogen-receptor are well known since  1998  [7].  It is
known that the  ring A  of  progestogens establish close contacts with the receptor,  whilst
the rest of a steroid is involved in less specific contacts [8].  The interactions involving the
ring A occur at the oxygen  (the 3-keto position of steroidal skeleton) [7].  Our calculations
hve shown  that  Homo of  progestogens  is  localized  exactly  at  this  oxygen.  Ionization
potential,   mainly   due   to   the  ionization  of  Homo,   has   predominantly   non-bonding
character at the position  3-keto.  Hardness  is related  to  Homo and Lumo which is in the
pi non-bonding orbital of carbonyl  at  the position 3 (ring A).  Charge  in  position 17  (and
possibly at position 13)  in  the  ring  D  can affect  the  ring A.  "Long  range"  interactions
between  positions  3  and  17  are well-known  [9]  and  have  considerably  influence  on
activity,  conformation and intramolecular electron transfer.
          In general,  selected molecular descriptors  have  shown  to  be directly or indirectly
related to properties of the ring A of progestogens.
FAPESP, CAPES

Bibliography
[1] Alexander, N. J., Scientific American, September, 104-109 (1995).
[2] Shoppee,  C.  W.,  Chemistry  of  Steroids,  2nd  ed.,  Ed.  Spottiwoode, Ballantyne  &
Co. Ltd., London, 1964, p. 185.
[3] Ringhold,  H.  J.,  Batres,  E., Bowers,  A.,  Edwards,  J.  Zderic,  J.,  J.  Amer. Chem.
Soc., 81, 3485-3486 (1959).
[4] Jurs, P. C., Chou, J. T. and Yuan, M., J. Med. Chem., 22, 476 (1979).
[5] Pirouette Multivariate Data  Analysis  for  IBM  PC Systems,  (version 2.0), Infometrix,
Seattle, WA (1996).
[6] Dewar, M. J. S. and Thiel, W. J., J. Am. Chem. Soc., 99, 4899 (1977).
[7] William, S. P.&Sigler, P. B., Nature, 393, 392-396 (1998).
[8] Duax,  W.  L.,  Griffin,  J.  F.  &  Weeks,  C.  M.,  in:  Interaction  of  Steroid  Hormone
Receptors with  DNA,  ed. Sluyser M.,  Ellis  Horwood  Ltd., Chichester,  England,  1985,
p. 83.
[9] Cvitas, T.; Kovac, B.;  Pasa-Tolic, Lj.; Ruscic, B.;  Klasinc, L.; Knop, J. V.; Bhacca, N.
S. and McGlynn, S. P., Pure & Appl. Chem., 61, 2139-2150 (1989).